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巨细胞病毒PCR试剂盒

Cytomegalovirus(CMV)
别名: 巨细胞病毒PCR试剂盒
储存条件: 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。CMV PCR 阳性对照需要单独放置, 不要污染其他试剂。  
巨细胞病毒PCR试剂盒
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储存条件: 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。CMV PCR 阳性对照需要单独放置, 不要污染其他试剂。

巨细胞病毒PCR试剂盒

英文名称:Cytomegalovirus(CMV)

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产品介绍:

产品及特点

巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)是一种疱疹病毒组 DNA 病毒。 亦称细胞包涵体病毒,由于感染的细胞肿大,并具有巨大的核内包涵体。巨细 胞病毒分布广泛,其他动物皆可遭受感染,引起以生殖泌尿系统,中枢神经系 统和肝脏疾患为主的各系统感染,从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。因 此对 CMV 的诊断快速诊断具有重要的意义。本产品就是根据 CMV 保守区设 计引物而开发的高灵敏 PCR 产品。本试剂盒具有下列特点它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增 CMV,不跟其他病毒发生交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。CMV PCR 阳性对照需要单独放置, 不要污染其他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试 剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。本试剂盒免费赠送 20 次核酸释放剂

2. 如果要制备 N 个样品,则需要做 N+2 个样品制备,包括一个样品制备阳 性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在 200μL 水中加 10μL CMV PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液作为阳性对照,样品制备阴 性对照是直接用 200μL 水。提取结束后最后得到 200μL 模板 DNA(每个 样品)放冰上待用,溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL,否则 PCR 抑 制物很可能会抑制 PCR。

二、设置 PCR 反应(40 μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阴性对照(用水)和一个 PCR 阳性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入 下列成分:

成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照管 PCR 阳性 对照管 PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL 巨细胞病毒 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - - PCR 阴性对照(水) - 18 μL - PCR 阳性对照(巨细胞病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀 释液) - - 18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程 温度 时间 预变性 93℃ 2 min PCR-1 反应 (10 个循环) 93℃ 45 sec 55℃ 60 sec PCR-2 反应 (30 个循环) 93℃ 30 sec 45℃ 60 sec 最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。2%琼脂糖电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。 预期的 PCR 产物长度为 86bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必 须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍 后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。 

  • 专业包装 正品保证

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