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别名: | AMP试剂盒 | ||
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储存条件: | 2-8℃ |
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货号 | 规格 | 可用库存 | 销售价(RMB) | 您的折扣价(RMB) | 购买数量 |
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熔点: | |
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密度: | |
储存条件: | 2-8℃ |
l 本试剂盒仅供科研使用。
l 检测范围:6nmol/L - 180 nmol/L。
l 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中一磷酸腺苷(AMP)含量。
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠一磷酸腺苷(AMP)水平。用纯化的大鼠一磷酸腺苷(AMP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入一磷酸腺苷(AMP),再与HRP标记的一磷酸腺苷(AMP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的一磷酸腺苷(AMP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠一磷酸腺苷(AMP)浓度。
试剂盒组成
试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
浓缩洗涤液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2-8℃保存 |
酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
标准品:320 nmol/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
封板膜 |
2张 |
2张 |
R.T. |
密封袋 |
1个 |
1个 |
R.T. |
说明书 |
1份 |
1份 |
R.T. |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
1. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
2. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
3. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.