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大鼠一磷酸腺苷(AMP)ELISA试剂盒

AMP ELISA kit
别名: AMP试剂盒
储存条件: 2-8℃ 
大鼠一磷酸腺苷(AMP)ELISA试剂盒
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ZY-AMP-Ra-96T 96T 现货 1760.00 1760
熔点:
密度:
储存条件: 2-8℃

 本试剂盒仅供科研使用。

检测范围6nmol/L - 180 nmol/L

本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中一磷酸腺苷(AMP)含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本大鼠一磷酸腺苷(AMP水平。用纯化的大鼠一磷酸腺苷(AMP抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入一磷酸腺苷(AMP再与HRP标记的一磷酸腺苷(AMP抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的一磷酸腺苷(AMP呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠一磷酸腺苷(AMP浓度。

试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

浓缩洗涤液

20ml×20)×1

20ml×30)×1

2-8保存

酶标包被板

1×48

1×96

2-8保存

标准品:320 nmol/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8保存

标准品稀释液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8保存

酶标试剂

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

样品稀释液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

显色剂A液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

显色剂B液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8保存

封板膜

2

2

R.T.

密封袋

1

1

R.T.

说明书

1

1

R.T.

 

标本要求 

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
  


2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟   

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

1. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

2. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

3. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
                                               

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

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