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| 别名: | HCC-70; HCC 70; HCC0070; Hamon Cancer Center 70 | ||
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| 储存条件: | -20℃ | ||
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| 货号 | 规格 | 可用库存 | 销售价(RMB) | 您的折扣价(RMB) | 购买数量 |
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| 储存条件: | -20℃ |
HCC70 人乳腺癌细胞（三阴性）
产品信息
| 名称 | HCC70 (人乳腺导管癌细胞) (STR鉴定正确) |
| 别称 | HCC-70; HCC 70; HCC0070; Hamon Cancer Center 70 |
| 种属 | 人 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 生长培养基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃ |
| 推荐传代比例 | 1:4 -1:6 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 背景描述 | HCC70 is an epithelial cell line isolated from a primary ductal carcinoma from a 49-year-old, Black female in 1992, and the cells took 44 months to establish. HCC70 is positive for the epithelial cell specific marker Epithelial Glycoprotein 2 (EGP2) and for cytokeratin 19.HCC70 is positive for the epithelial cell specific marker Epithelial Glycoprotein 2 (EGP2) and for cytokeratin 19. However, recent studies performed outside of ATCC have given conflicting results about the status of the estrogen receptor for these cells. The cells are poorly differentiated. The cells overexpress p53, and are negative for the expression of Her2-neu oncogenes. The depositor of CRL-2315 initially reported the cells were positive for estrogen receptors. |
| 年龄（性别） | 女性，49岁 |
| 组织来源 | 乳腺 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 肿瘤类型 | 乳腺导管癌 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 倍增时间 | 93 hours (PubMed=25984343) |
| 基因表达情况 | epithelial glycoprotein 2 (EGP2); cytokeratin 19 |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-2315 |
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
c、弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
d、待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
c、用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
d、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
