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别名: | 电泳级耐热型SYBR染料 | ||
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储存条件: | 常温运输保存(闭光),保存期为一年。 |
货号 | 规格 | 可用库存 | 销售价(RMB) | 您的折扣价(RMB) | 购买数量 |
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储存条件: | 常温运输保存(闭光),保存期为一年。 |
电泳级耐热型SYBR染料
英文名称:SuperSYBR, EG
运输:低温
保存:负20℃
有效期:1年
货期:现货
其他:
产品介绍:
产品及特点
本产品是改良型的 SYBR Green I,它跟常规的 SYBR Green I 相比检测灵敏度相当,但具有耐热、耐水解的特点,所以十分稳定,使用更加方便。
1. 稳定,本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上,方便运输和保存。本产品的1X 工作液在常温下的半衰期为 120 多天,比常规的 SYBR Green I(5 天)长 20 倍以上。
2. 使用方便多样,既可以在制备凝胶时加入到融化的琼脂糖凝胶中,还可以象常规的 SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar 一样用于电泳后染色。
3. 灵敏,其检测灵敏度跟 SYBR Green I 相同,比 EB 灵敏 200-100 倍。
4. 低毒、环保、健康。
5. 可检测各种核酸分子,包括 dsDNA、ssDNA、RNA 和 Oligo。
6. 兼容性好,不但与常用的 TAE、TBE 和 5 分钟超快电泳缓冲液 SuperBuffer-2等兼容,还与常用的 UV 检测系统和可见光激发检测系统兼容。
7. 对 DNA 泳动速度的影响小于常规的 SYBR Green I。
8. 半衰期长,自然损耗低,可多次使用,使其相对使用成本比常规的 SYBR GreenI 和其它非对称花青类染料低。
运输及保存 常温运输保存(闭光),保存期为一年。
自备试剂 电泳试剂
使用方法
本产品可以在电泳中染色,优点是用量少,但如果与 DNA 的比例没达到最佳时,带型容易弥散;也可以在电泳后染色,优点是不会对 DNA 电泳产生干扰,但用量大,还需要额外的染色过程。客户可以根据需要选择使用方法。基因不建议将本产品用于染色后再上样(即先将其与 DNA 混合然后再上样),也不建议将其用于 PAGE(因分子较大,难以进入凝胶)。
使用方法之
一:电泳中染色(仅适于琼脂糖凝胶电泳)
1. 按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。
2. 将按 1:10000 的比例将 SuperSYBR 直接加到熔化的琼脂糖凝胶中并充分摇晃均匀(5 uL 可以加入到 50 mL 熔化的琼脂糖凝胶中),然后倒胶。
3. 其余的上样、电泳、UV 观察等步骤按常规操作进行。在 254 nm 紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用 300 nm 紫外照射透视仪观察也可以,但效果不如 254 nm。
4. 未用完的胶可以反复融化,如果保存时间在一周以上,最好闭光。注意:本方法的灵敏度比在熔化的琼脂糖凝胶中加 EB 染色的方法高,比电泳后染色经济(后者用量大)。SuperSYBR 与 DNA 结合同 SYBR Green I 跟
DNA 的结合一样,有时会影响 DNA 样品的相对迁移率。如果出现 DNA 电泳带弥散的现象,说明 SuperSYBR 和 DNA 的比例没达到最佳,可以适当调节DNA 的上样量。
使用方法之二:电泳后染色
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用水将 10000×SuperSYBR 原液稀释 2500 倍成 4×工作液(如:将 5 uLSuperSYBR 原液加到 10 mL 水和 2.5 mL 5 M NaCl 中,加 NaCl 的目的是促进 SuperSYBR 与 DNA 的结合)。由于 SuperSYBR 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲和力,故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
3. 将电泳后染色工作液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色 10-30 分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。
4. 在 254 nm 紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时最好使用绿色滤光片。如果使用 300 nm 紫外照射透视仪观察也可以,但效果不如 254 nm。
注意:电泳后染色工作液可以冷冻避光储存,可以在一个星期内重复使用多次。