即用型高保真PCR试剂盒

即用型高保真PCR试剂盒

英文名称：Instant HiFi PCR Kit 

运输：低温

保存：负20℃

有效期：1年

货期：1-2天

其他：

产品介绍：

高保真扩增

产品及特点 

本产品是即用型的 2×高保真 PCR 预配反应液，含有除引物、模板以外的所有PCR 试剂，包括 Pfu DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等，特别适合于高保真 PCR 反应。

1. Pfu DNA 聚合酶是使用最广泛的高保真酶，其保真度为普通 Taq 酶的 10 倍。

2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到 1 倍浓度即可进行 PCR 反应，非常方便，简化了 PCR 的准备工作。

3. PCR 反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少，有利于减少污染，降低实验误差。

4. 本产品含电泳染料，PCR 反应液可直接上样电泳，进一步简化了操作。

5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化，反应的灵敏度高，特异性强。

6. 适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验，得到的 PCR 产物可用于平末端克隆。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。

自备试剂 模板和引物。

使用方法 

将本产品与用户自备的模板，引物混合液按下列推荐使用量（30 uL 反应体系）加入 PCR 管中即可进行 PCR，反应结束后直接取 5-15 uL 电泳检查扩增结果。如果反应体系不是 30 uL，各成分需要按比例增加或减少。

2×高保真 PCR MagicMix 15 uL

DNA 模板(自备)

哺乳动物基因组 DNA 0.5-1 ug

酵母基因组 DNA 5-500 ng

细菌基因组 DNA 0.5-50 ng

质粒 DNA 5-500 pg

PCR 回收片段 1-100 pg

PCR 引物(自备) 10-20 pmol each

补水到 30 uL

放入 PCR 仪中进行 PCR。由于含有电泳示踪剂（注意：不是溴化乙锭等 DNA染料），故 PCR 结束后可以取 5-10 uL 直接上样电泳, 红色染料电泳速度相当于 50

bp DNA 片段。

参考扩增条件：

预变性 94℃ 4 min

PCR (30 个循环)

94℃ 30 s

50℃ 30 s

68℃ 0.5kb/ min

延伸 68℃ 10 min

注意：

1. 本产品的 Pfu DNA 聚合酶比 Taq DNA 聚合酶的延伸反应速率低，因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每 kb 需 2 分种。

2. Pfu 酶 3’-5’外切酶活性可降解引物，所以强烈建议在冰上配置完成 PCR反应液后，立即放入 PCR 仪中进行扩增，扩增完毕后立即进行电泳检测。

3. 本产品扩增产物为平末端，不可以直接进行 TA 克隆，可以使用B 载体(CAT#:51104)进行克隆。如需要进行 TA 克隆，建议对 PCR 产物纯化后，用加 A 试剂盒(CAT#:60105)加 A 后再进行 TA 克隆。

4. 由于 Pfu 无 5’到 3’外切酶的活性，所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR 。