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| 别名: | 大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞 | ||
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| 储存条件: | 干冰运输、-80℃保存，有效期半年。 | ||
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| 储存条件: | 干冰运输、-80℃保存，有效期半年。 |
大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞
英文名称：E.coli BL21 Star(DE3) Chemical Competent Cell
运输：干冰
保存：负80度
有效期：6个月
货期：1-2天
其他：
产品介绍：
产品及特点
BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于 BL21(DE3)菌株，由特殊工艺制作，使用 pUC19质粒检测本产品，转化效率可达 107cfu/μg。BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有 rne131 基因突变体。rne131 突变基因能够增强菌株细胞内 mRNA 的稳定性，从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于 T7 启动子表达载体(如 pET 系列)的高水平蛋白表达。菌株基因型为：F- ompT hsdSB(rB-mB) gal dcm rne131(DE3)
运输及保存 干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂 目的 DNA、LB 培养基等
使用方法
1. 从-80℃冰箱中取出感受态细胞，置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
2. 取 100μL 冰上融化的 BL21 Star(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。
3. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。
4. 向离心管中加入 700μL 不含抗生素的无菌培养基(LB)，混匀后 37℃，200rpm 复苏60 分钟。
5. 取 100μL 左右菌液涂布于含相应抗生素的 LB 培养基上。如果转化高浓度的质粒，可以减少涂布的量。
6. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。
