人类HER-2基因PCR试剂盒

人类HER-2基因PCR试剂盒

英文名称：Human HER-2 Gene PCR Kit 

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产品介绍：

产品及特点

人类 HER-2 基因（Human HER-2 Gene）是迄今为止被研究的比较透 彻的乳腺癌基因之一。该基因是临床治疗监测的预后指标，也是肿瘤靶向治疗 药物选择的一个重要靶点。HER-2 癌基因的致瘤机制是抑制凋亡，促进增殖； 增加肿瘤细胞的侵袭力；促进肿瘤血管新生和淋巴管新生。血清 HER-2 与乳 腺癌患者的肿瘤负荷、组织学 HER-2、淋巴结状况均有一定关联，并可能是一 个独立的预后因素，可能对化疗或内分泌治疗疗效产生一定影响，因此快速检 测具有重要的意义。本试剂盒根据荧光定量 PCR 原理开发，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增人类 HER-2 基因。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。

6. 本产品只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备 

1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL 阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数基因组 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式动物 DNAout。本试剂盒免费赠送20 次免 DNA 提取的核酸释放剂，本产品的裂解液可以直接作为PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。其使用手册可从本公司网

二、设置 PCR 反应（40 μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性

对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分N+2 个

样品管PCR 阴性对照

PCR 阳对照

PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL

人类 HER-2 基因 PCR 引

物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL

N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -

PCR 阴性对照(用水替代) - 18 μL -

PCR 阳性对照 - - 18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程 温度 时间预变性 95℃ 5 min

PCR 反应（35 个循环）

95℃ 15 sec

55℃ 15 sec

72℃ 10 sec

最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR产物长度为 295bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩

增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。