非洲猪瘟病毒PCR试剂盒

非洲猪瘟病毒PCR试剂盒

英文名称：African Swine Fever Virus(ASFV)

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产品介绍：

产品及特点 

非洲猪瘟(African swine fever, ASF) 是由非洲猪瘟病毒(African swinefever virus, ASFV) 引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病，病死率高达 100%，是我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病，受到世界各国的高度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定，对该病的预防和检疫有着重要作用，为此本公司开发了 ASFV 的 PCR 检测试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物经过优化，灵敏性比使用世界动物卫生组织推荐的引物高100倍以上。

3. 特异性高，引物是根据保守的 vp72 基因设计。

4. 提供阳性对照，便于分析实验结果。

5. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

6. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。非洲猪瘟病毒 PCR 阳性对照需要单

独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒DNAout。本试剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的核酸释放剂

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个阳性对照和一个阴性对照。阳性对照是在在水中加 10μL 非洲猪瘟病毒 PCR 阳性对照的 10000倍稀释液作为阳性对照，完成提取过程，阴性对照是直接用 200μL 水作为阴性对照，完成提取过程。

二、PCR（60 μL 体系）

3. 样品管：在 N+4 个 PCR 管中加入下列成分：

成分

N+2 个

样品管

PCR

阴性对照

PCR

阳性对照

PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL

非洲猪瘟病毒 PCR 引物液 各 2 μL 2 μL 2 μL

N+2 个制备的 DNA 模板 各 18 μL - -

水 - 18 μL -

非洲猪瘟病毒 PCR 阳性对

照的 10000 倍稀释液 - - 18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程 温度 时间

预变性 94℃ 5 min

PCR 反应

（35 个循环）

94℃ 1 min

50℃ 1 min

72℃ 1 min

最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物直接进行琼脂糖凝胶电泳（本产品不需要单独加loading buffer），最好使用 100 bp DNA Marker，如果样品为阳性，将会得到长度为 278 bp 的扩增产物。