土拉热弗朗西斯菌PCR试剂盒

土拉热弗朗西斯菌PCR试剂盒

英文名称：Francisella tularensis

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

其他：

产品介绍：

产品及特点

土拉热弗朗西斯菌（Francisella tularensis）会引起土拉杆菌病，又称野 兔热，是一种自然疫源性疾病，主要感染野生啮齿动物并可传染给其他动物和 人类。感染后的主要表现为体温升高，肝、脾、肾肿大，充血和多发性粟粒坏 死，淋巴结肿大，并有针尖大干酪样坏死灶，该疾病的传播会给养殖业带来较 大的经济损失，因此快速检测具有重要意义。本试剂盒根据 PCR 原理开发，它 具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供细菌 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增土拉热弗朗西斯菌。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。

6. 本产品只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL 阳性对照的10000 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作 为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌 DNA 提取试 剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌 DNAout 或柱式细菌 DNAout。本试 剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的核酸释放剂，本产品的裂解液可 以直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。

二、设置 PCR 反应（40 μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照 PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL 土拉热弗朗西斯菌 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - - PCR 阴性对照(水) - 18 μL - PCR 阳性对照（用土拉热弗 朗西斯菌 阳 性 对 照 的 10000 倍稀释液 - - 18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程 温度 时间 预变性 95℃ 5 min PCR 反应 （35 个循环） 95℃ 15 sec 55℃ 15 sec 72℃ 10 sec 最后延伸 72℃ 10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 250bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。