肠贾第虫LAMP试剂盒

肠贾第虫LAMP试剂盒

英文名称：Giardia intestinalis

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

其他： 

产品介绍

产品及特点

肠贾第虫（Giardia intestinalis）又叫蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia 或 Giardia duodenalis)简称贾第虫，主要寄生在人体肠道内，引起贾第虫病 （giardiasis），主要症状是腹痛、腹泻和吸收不良等症状。贾第虫也可感染动 物，如哺乳动物、鸟类、爬虫类、两栖动物。由于肠贾第虫是人体肠道感染的 常见寄生虫之一，也是发展中国家除病毒外的引起腹泻的最主要病原，因此对 肠贾第虫进行快速灵敏的诊断具有重要的意义。本产品就是根据肠贾第虫保守 区设计引物而开发的高灵敏 LAMP 产品。它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 样品。

2. 用 LAMP 恒温扩增法扩增肠贾第虫特异片段，不需要荧光 PCR 等贵重仪 器。同时扩增时间只需要 1 小时，尤其适合现场或实验条件简陋的单位使 用。

3. 检测灵敏性比 PCR 高 10 倍以上。

4. 特异性高，由于使用四条针对肠贾第虫保守基因的特异引物，比使用 2 条 引物的 PCR 专一性更高。

5. 提供无传染性的 LAMP 阳性对照，便于分析实验结果。

6. 本试剂盒足够做 50 次 20μL 体系的 LAMP 扩增。

7. 本产品只能用于科研。 规格及成分 成 份 编号 十孔盒包装 2×LAMP MagicMix

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。肠贾第虫 LAMP 阳性对照最好单独 放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 待测样品。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化样品 DNA，本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取试 剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个样品制备，包括一个样品制备阳性对 照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。样品使用量根据所选择的试剂 盒决定。如果样品使用量为 XmL，则在 XmL 水中加 10μL 肠贾第虫 LAMP 阳性对照的 1 万倍稀释液作为样品制备阳性对照，样品制备阴性对照是直 接用 X mL 水作为阴性对照，然后和 N 个样品一起进行病毒 DNA 提取操 作，得到 N+2 个 DNA 样品。

二、LAMP（20μL 体系）

3. 反应设置：如果有 N+2 个 DNA 纯化样品，则最好设置 N+4 个 LAMP 扩 增，增加 LAMP 阴性对照和阴性对照各 1 个。在 N+4 个 PCR 管中加入下 列成分：

成分 N+2 个 样品管 LAMP 阴性对照 LAMP 阳性对照 2×LAMP MagicMix 各 10 μL 10 μL 10 μL 5×肠贾第虫 LAMP 引物混合液 各 4 μL 4 μL 4 μL N+2 个样品 DNA 各 6 μL - - 自备超纯水 6 μL 肠贾第虫 LAMP 阳性 对照的 1 万倍稀释液 - - 6 μL

4. 置于 65℃保温 60-120 分钟。如果是在 PCR 仪中保温，必须加热盖。如 果用金属浴保温，没有热盖，建议覆盖 30μL 石蜡油，否则保温期间反应 体系的水分会蒸发，影响反应效率。

5. 电泳确认实验结果：取 10μL LAMP 扩增产物直接进行 2%琼脂糖凝胶电 泳。如果 LAMP 阳性对照有正常 LAMP 条带（200bp 的梯形扩增产物） 而 LAMP 阴性对照（以水为模板）没有，则实验有效。如果 LAMP 阳性对 照没有扩增出条带，则试剂盒的问题，请跟厂家联系。如果 LAMP 阴性对 照有扩增出条带，则说明 LAMP 样品或试剂有过去的 LAMP 扩增产物的污 染，需要注意操作的规范性，严格扩增前和扩增后的分区。如果还不能解 决问题，可以联系厂家重新设计 LAMP 引物扩增新的靶片段。

6. 典型的电泳结果见下表（奇数样为阴性结果，偶数样为阳性结果。此处的 9 号和 10 号跟上步照片中的 9 号和 10 号是相同的两个样品）：