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| 别名: | 猪痢疾密螺旋体PCR试剂盒 | ||
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| 储存条件: | 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。 | ||
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| 货号 | 规格 | 可用库存 | 销售价(RMB) | 您的折扣价(RMB) | 购买数量 |
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| 储存条件: | 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。 |
梅毒螺旋体(苍白密螺旋体)PCR试剂盒
英文名称：Treponema hyodysenteriae
运输： 低温
保存： -20℃
有效期： 一年
货期： 2-4周
其他：
产品介绍：
产品及特点
猪痢疾密螺旋体（Treponema hyodysenteriae）为猪的一种传染性粘膜 出血性结肠炎。临床特征为消瘦，排泻粪便中含有粘液、血液和坏死物，不经 治疗的病猪可能死亡。因此快速灵敏检测猪痢疾密螺旋体具有重要意义。本产 品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增猪痢疾密螺旋体，与其他微生物没 有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL 阳性对照的10000 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作 为 PC。另外用水作为 NC。
2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数 DNA 提取试剂盒 兼容。本试剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的核酸释放剂，本产品 的裂解液可以直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。
二、设置 PCR 反应（40 μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照
PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
苍白密螺旋体 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -
样品制备阴性对照 - 18 μL -
样品制备阳性对照（阳性对照的 10000 倍稀释液） - - 18 μL
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 温度 时间
预变性 95℃ 5 min
PCR 反应 （35 个循环） 95℃ 15 sec 58℃ 15 sec 72℃ 30 sec
最后延伸 72℃ 10 min
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 202bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
