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HT-29(人结肠癌细胞)

HT-29
别名: HT 29; HT29;HT-29;人结肠癌细胞
储存条件: -20℃ 
HT-29(人结肠癌细胞)
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ZY-C6451H-ZY-C6451H 1×10^6cells/T25培养瓶 现货 1400.00 1400.00
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HT-29(人结肠癌细胞)  

一、细胞基本属性
细胞名称 HT-29人结肠癌细胞(STR鉴定正确)
细胞别称 HT 29; HT29;HT-29;人结肠癌细胞
种属来源
年龄性别 女;44岁
组织来源 结肠
生长特性 贴壁生长
细胞形态 上皮细胞样
细胞代数 10代以内
特别注意 该细胞贴壁及展开较慢,24h后有部分细胞依然有一部分细胞未展开贴壁属于正常现象,最好传代后24- 48h内尽量不要移动
背景介绍 HT-29细胞系由J.Fogh在1964年用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离。近来,已建株的培养细胞用含血清McCoy’s 5A培液培养。该细胞系在裸鼠中致瘤,也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。
STR位点  Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:11,12;D16S539:11,12;D18S51:13;D19S433:14;D21S11:29,30;D2S1338:19,23;D3S1358:15,16.3;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:10,16;FGA:20,22;TH01:6,9;TPOX:8,9;vWA:17,19;
生物安全等级 1
染色体 64~69
倍增时间 ~36-60 hours
致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.
受体表达情况 human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A
基因表达情况 secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).
细胞规格 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测
保藏机构 ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV; CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201;中国典型培养物保藏中心细胞库
培养基 90%5A+10% FBS+PS
培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件 无血清冻存液,液氮储存

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。 

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;

c、弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;

d、待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。 

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

b、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;

c、用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;

d、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。 

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。 

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。 

4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。 

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。 

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。

9. 注意:  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

 

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