牛疱疹病毒1型LAMP试剂盒

牛疱疹病毒1型LAMP试剂盒

英文名称：Bovine Hepervirus 1 (BHV-1)

运输：低温

保存：负20度

有效期：一年

货期：2-3周

其他： 

产品介绍：

产品及特点 

牛疱疹病毒1型(Bovine Hepervirus 1，BHV-1)是一种DNA病毒，会引起肉牛恶性卡他热病，自然感染的情况下，主要是牛容易发生该病，尤其是1～4岁的牛比较容易发生，而老龄牛和幼龄牛相对比较少发病。病牛往往突然出现高热，体温升高达到41-42℃，呈稽留热，且体质迅速虚弱，接着眼、口、鼻黏膜很快出现严重炎症。双眼不停流泪，眼脸发生肿胀闭合，且有纤维素性脓性分泌物流出，角膜发生混浊，甚至形成溃疡，最终导致失明。这一疾病对养牛业造成巨大危害，因此牛疱疹病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。为此本公司开发了简单快捷的牛疱疹病毒1型LAMP检测试剂盒，它具有下列特点：

1.即开即用，用户只需要提供病毒样品。

2.用LAMP恒温扩增法扩增牛疱疹病毒1型特异片段，不需要荧光PCR等贵重仪器。同时扩增时间只需要1小时，尤其适合现场或实验条件简陋的单位使用。

3.检测灵敏性比PCR高10倍以上。

4.特异性高，由于使用四条针对牛疱疹病毒1型保守基因的特异引物，比使用2条引物的PCR专一性更高。

5.提供无传染性的阳性对照，便于分析实验结果。

本试剂盒足够做50次20μL体系的LAMP扩增。本产品只能用于科研。

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。牛疱疹病毒1型LAMP阳性对照最好单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂 待测样品。

使用方法 一、样品DNA的制备

1.用自选方法纯化病毒样品DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容，包括本公司的一管式病毒DNAout或其升级版柱式病毒DNAout。本试剂盒免费赠送20次核酸释放剂试用装

2.如果有N个样品，则需要做N+2个样品制备，包括一个样品制备阳性对照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。样品使用量根据所选择的试剂盒决定。如果样品使用量为XmL，则在XmL水中加10μL牛疱疹病毒1型LAMP阳性对照的1万倍稀释液作为样品制备阳性对照，样品制备阴性对照是直接用X mL水作为阴性对照，然后和N个样品一起进行病毒DNA提取操作，得到N+2个DNA样品。

二、LAMP（20μL体系）

3.反应设置：如果有N+2个DNA纯化样品，则最好设置N+4个LAMP扩增，增加LAMP阴性对照和阴性对照各1个。在N+4个PCR管中加入下列成分：

成分 N+2个

样品管 LAMP

阴性对照 LAMP

阳性对照

LAMP MagicMix 各10 μL 10 μL 10 μL

牛疱疹病毒1型

LAMP引物混合液 各4 μL 4 μL 4 μL

N+2个样品DNA 各6 μL - -

自备超纯水 6 μL

牛疱疹病毒1型阳性对照的1万倍稀释液 - - 6 μL

4.置于65℃保温60分钟。如果是在PCR仪中保温，必须加热盖。如果用金属浴保温，没有热盖，建议覆盖30μL石蜡油，否则保温期间反应体系的水分会蒸发，影响反应效率。

5.电泳确认实验结果：取10μL LAMP扩增产物直接进行2%琼脂糖凝胶电泳。LAMP阳性对照必须有正常LAMP条带（200bp的梯形扩增产物），LAMP阴性结果必须无条带，否则实验结果无效。如果LAMP阳性对照和阴性对照结果正常，再分析待测样品。

6.典型的电泳结果见下表（奇数样为阴性结果，偶数样为阳性结果。此处的9号和10号跟上步照片中的9号和10号是相同的两个样品）：